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  • ?Crispr/Cas9 基因编辑腺病毒包装

    Crispr/Cas9 腺病毒包装服务

     

     

          Crispr/Cas9 简介

    CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前,来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用广泛。Cas9 蛋白(含有两个核酸酶结构域,可以分别切割DNA 两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物,然后通过PAM序列结合并侵入DNA,形成RNA-DNA复合结构,进而对目的DNA双链进行切割,使DNA双链断裂。

    CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞,是目前高效的基因组编辑系统。

    通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造,将其连接在一起得到sgRNA(single guide RNA)。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力,但因为结构得到了简化更方便研究者使用。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接,得到可以同时表达两者的质粒,将其转染细胞,便能够对目的基因进行操作。

    ??粕锎葱滦缘氖状谓玞as9和gRNA整合到腺病毒载体中,成功包装cas9腺病毒和gRNA腺病毒,很大程度上弥补了crispr/cas9质粒感染效率低,从而导致敲除效率低的缺陷。

    ??粕锿瞥龅腃as9/gRNA腺病毒利用cas9和gRNA结合特异性,同时借助腺病毒高感染效率,高表达效率,提高crispr/cas9基因敲除效率,缩短基因敲除周期,使得基因敲除周期短,成本低,更易于操作。


    • 产品详情

    Crispr/Cas9 腺病毒包装服务

     

     

          Crispr/Cas9 简介

    CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前,来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用广泛。Cas9 蛋白(含有两个核酸酶结构域,可以分别切割DNA 两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物,然后通过PAM序列结合并侵入DNA,形成RNA-DNA复合结构,进而对目的DNA双链进行切割,使DNA双链断裂。

    CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞,是目前高效的基因组编辑系统。

    通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造,将其连接在一起得到sgRNA(single guide RNA)。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力,但因为结构得到了简化更方便研究者使用。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接,得到可以同时表达两者的质粒,将其转染细胞,便能够对目的基因进行操作。

    ??粕锎葱滦缘氖状谓玞as9和gRNA整合到腺病毒载体中,成功包装cas9腺病毒和gRNA腺病毒,很大程度上弥补了crispr/cas9质粒感染效率低,从而导致敲除效率低的缺陷。

    ??粕锿瞥龅腃as9/gRNA腺病毒利用cas9和gRNA结合特异性,同时借助腺病毒高感染效率,高表达效率,提高crispr/cas9基因敲除效率,缩短基因敲除周期,使得基因敲除周期短,成本低,更易于操作。

    Crispr/Cas9腺病毒特点:
       

    1、可感染多种分裂期和非分裂期细胞,感染效率高、敲除效率高;

    2、操作简单,容易掌握;

    3、基因敲除周期短,成本低;

    4、适合哺乳动物不同种属不同基因的操作,适用范围广。

     

    服务流程

     

     

     

    参考文献

       1、Laterodorsal tegmentum interneuron subtypes oppositely regulate olfactory cue-induced innate fear;

         (2016年发表于Nature Neuroscience,作者:段树民)

       2、Endoplasmic reticulum stress induced by tunicamycin and thapsigargin protects against transient ischemic brain injury Involvement of PARK2-dependent mitophagy;

         (2016年发表于Autophagy作者:Xiangnan Zhang

       3、SNX13 reduction mediates heart failure through degradative sorting of apoptosis repressor with caspase recruitment domain;

         (2016年发表于Nature Communications,作者:陈义汉)

       4、TRB3 links insulin IGF to tumour promotion by interacting with p62 and impeding autophagic proteasomal degradations;

         (2016年发表于Nature Communications,作者:胡卓伟)

       5、Suppression of KRas-mutant cancer through the combined inhibition of KRAS with PLK1 and ROCK;

         (2016年发表于Nature Communications,作者:刘明耀)

       6、POH1 deubiquitylates and stabilizes E2F1 to promote tumour formation;

         (2015年发表于Nature Communications,作者:Yongzhong Liu)


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