• 为墨镜搭配一支好唇膏:酷girl也能不一样 2019-03-21
  • 日本大阪地震已致4人死亡 370多人受伤 2019-03-08
  • 俄侦察船穿越英吉利海峡 英国急派军舰战机监视 2019-03-07
  • 压倒性态势是如何形成的——党的十八大以来反腐倡廉工作综述 2019-03-07
  • 精打细算会过日子 这三款小型SUV保养很便宜 2019-03-02
  • 别做梦了,醒醒吧。一个国家强大,教育是重要的。没有你说的那样美国妒忌心态。美国害怕的是中国不改革不开放,因为中国一旦做自己的企业,走自己的道路,对美国来说意味美 2019-03-02
  • 萨拉赫缺阵 埃及队遭“绝杀” 2019-02-27
  • 淮北日报社党委书记、社长张士锋祝贺人民日报创刊70周年 2019-02-27
  • 人人都能享用绿豆汤吗 关于绿豆汤的禁忌你得知道 2019-02-23
  • 香港迪士尼推“无现金”体验便利游客 2019-02-23
  • 全国首起公益诉讼调解结案案件:被告同意全部诉讼请求 2019-02-23
  • NBA改变选秀规则提上日程 詹姆斯父子统治联盟更近一步 2019-02-20
  • 贵州望谟山体坍塌1人被埋  消防徒手刨土救人 2019-02-20
  • 保护教师教育学生的权利 2019-01-30
  • 中国工程院院士倪光南谈“发展核心技术 建设网络强国” 2019-01-30
  • 慢病毒包装

    慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。

    • 产品详情

    产品简介

     

          慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。

     

     

    病毒服务项目

     

          ??粕锾峁┞《驹靥骞菇?、RNAi(shRNA)、miRNA、过表达和干扰慢病毒包装以及基于慢病毒技术的稳定细胞系构建服务。

       

     

    整体实验流程

     

    (一) 实验流程(1、2、3为并列步骤)

     

          1. 慢病毒过表达质粒载体的构建 设计上下游特异性扩增引物,同时引入酶切位点,采用PCR技术(采用高保真KOD酶,3K内突变率为0%)从模板中(cDNA质?;蛘呶目猓┑魅∧康幕駽DS区(coding sequence)连入T载体。将CDS区从T载体上切下,装入慢病毒过表达质粒载体。

     

         2. 慢病毒干扰质粒载体的构建 合成siRNA对应的DNA颈环结构,退火后连入慢病毒干扰质粒载体。

     

         3. miRNA载体构建从 Genomic 中调取基因相应的Mir 前体, 并在调取引物中引入酶切位点。

     

         4. 慢病毒载体的包装与浓缩纯化 制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒(两质粒包装系统),三种质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提,共转染293T细胞,转染后6 h 更换为完全培养基,培养48和72h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。

     

    (二)流程图

     

     

     

    提供产品

     

    产品名称病毒滴度规格赠送阴性对照病毒规格
    过表达慢病毒>10^8 PFU/ml1ml1ml(>10^8 PFU/ml
    干扰慢病毒>10^8 PFU/ml1ml1ml(>10^8 PFU/ml)

     

     参考文献

       1、MicroRNA-30 family members regulate calcium/calcineurin signaling in podocytes;

         (2016年发表于JCI,作者:刘志红)

       2、TGF-β1 promotes osteosarcoma cell migration and invasion through the miR-143-versican pathway;

         (2014年发表于Cellular Physiology and Biochemistry,作者:Shaohua Li and Tao Cheng

       3、miR-451a Inhibited Cell Proliferation and Enhanced Tamoxifen Sensitive in Breast Cancer via Macrophage Migration Inhibitory Factor;

         (2015年发表于BioMed Research International,作者:李红)

       4、Smad4 mediated BMP2 signal is essential for the regulation of GATA4 and Nkx2. 5 by affecting the histone H3 acetylation in H9c2 cells;

         (2014年发表于Biochemical and Biophysical Research Communications,作者:田杰)

       5、Effects and mechanism of downregulation of COX?2 expression by RNA interference on proliferation and apoptosis of human breast cancer MCF?7 cells;

         (2014年发表于Molecular Medicine Reports,作者:hui Han)

       6、MicroRNA-486-5p targeting PIM-1 suppresses cell proliferation in breast cancer cells;

         (2014年发表于Tumor Biology,作者:Zhenlin Yang)


    未分类

    产品>  

    本网站由阿里云提供云计算及安全服务
  • 为墨镜搭配一支好唇膏:酷girl也能不一样 2019-03-21
  • 日本大阪地震已致4人死亡 370多人受伤 2019-03-08
  • 俄侦察船穿越英吉利海峡 英国急派军舰战机监视 2019-03-07
  • 压倒性态势是如何形成的——党的十八大以来反腐倡廉工作综述 2019-03-07
  • 精打细算会过日子 这三款小型SUV保养很便宜 2019-03-02
  • 别做梦了,醒醒吧。一个国家强大,教育是重要的。没有你说的那样美国妒忌心态。美国害怕的是中国不改革不开放,因为中国一旦做自己的企业,走自己的道路,对美国来说意味美 2019-03-02
  • 萨拉赫缺阵 埃及队遭“绝杀” 2019-02-27
  • 淮北日报社党委书记、社长张士锋祝贺人民日报创刊70周年 2019-02-27
  • 人人都能享用绿豆汤吗 关于绿豆汤的禁忌你得知道 2019-02-23
  • 香港迪士尼推“无现金”体验便利游客 2019-02-23
  • 全国首起公益诉讼调解结案案件:被告同意全部诉讼请求 2019-02-23
  • NBA改变选秀规则提上日程 詹姆斯父子统治联盟更近一步 2019-02-20
  • 贵州望谟山体坍塌1人被埋  消防徒手刨土救人 2019-02-20
  • 保护教师教育学生的权利 2019-01-30
  • 中国工程院院士倪光南谈“发展核心技术 建设网络强国” 2019-01-30