• 老年人社保年审如何更便利 2019-05-17
  • 世界上海拔最高的无人超市将落户拉萨 2019-05-07
  • 【理上网来·喜迎十九大】“引进来”与“走出去”水平不断提高:我国吸收外资及对外投资情况“亮点纷呈” 2019-05-06
  • 国防部举行盛大招待会 热烈庆祝中国人民解放军建军90周年 中共中央总书记国家主席中央军委主席习近平和李克强张德江俞正声刘云山王岐山张高丽出席 2019-05-05
  • 把黄土高坡变绿的造林人 2019-05-05
  • 美俄掀起新一轮互相制裁风波。 2019-05-02
  • 电视剧抱团出海 又有哪些作品走出了国门 2019-04-29
  • 【访民情 惠民生 聚民心】多措并举拓宽村民脱贫路 2019-04-29
  • 湖州南浔赶超发展注入青春力量 2019-04-28
  • 端午小长假 我省北中部有雨 2019-04-23
  • 21岁CEO为留学生做“安保” 2019-04-23
  • 湖州德清义务教育标准化学校创建率达97.4% 2019-04-21
  • 房地产就有国家和集体之土地不计价到计价,这笔是经济收入还是财产收入? 2019-04-21
  • 凤凰古城端午抢鸭子大战引万人围观 2019-04-20
  • 警惕这些假冒高校网站!坑钱,还会毁了孩子前程! 2019-04-19
  • 慢病毒包装

    慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。

    • 产品详情

    产品简介

     

          慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。

     

     

    病毒服务项目

     

          ??粕锾峁┞《驹靥骞菇?、RNAi(shRNA)、miRNA、过表达和干扰慢病毒包装以及基于慢病毒技术的稳定细胞系构建服务。

       

     

    整体实验流程

     

    (一) 实验流程(1、2、3为并列步骤)

     

          1. 慢病毒过表达质粒载体的构建 设计上下游特异性扩增引物,同时引入酶切位点,采用PCR技术(采用高保真KOD酶,3K内突变率为0%)从模板中(cDNA质?;蛘呶目猓┑魅∧康幕駽DS区(coding sequence)连入T载体。将CDS区从T载体上切下,装入慢病毒过表达质粒载体。

     

         2. 慢病毒干扰质粒载体的构建 合成siRNA对应的DNA颈环结构,退火后连入慢病毒干扰质粒载体。

     

         3. miRNA载体构建从 Genomic 中调取基因相应的Mir 前体, 并在调取引物中引入酶切位点。

     

         4. 慢病毒载体的包装与浓缩纯化 制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒(两质粒包装系统),三种质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提,共转染293T细胞,转染后6 h 更换为完全培养基,培养48和72h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。

     

    (二)流程图

     

     

     

    提供产品

     

    产品名称病毒滴度规格赠送阴性对照病毒规格
    过表达慢病毒>10^8 PFU/ml1ml1ml(>10^8 PFU/ml
    干扰慢病毒>10^8 PFU/ml1ml1ml(>10^8 PFU/ml)

     

     参考文献

       1、MicroRNA-30 family members regulate calcium/calcineurin signaling in podocytes;

         (2016年发表于JCI,作者:刘志红)

       2、TGF-β1 promotes osteosarcoma cell migration and invasion through the miR-143-versican pathway;

         (2014年发表于Cellular Physiology and Biochemistry,作者:Shaohua Li and Tao Cheng

       3、miR-451a Inhibited Cell Proliferation and Enhanced Tamoxifen Sensitive in Breast Cancer via Macrophage Migration Inhibitory Factor;

         (2015年发表于BioMed Research International,作者:李红)

       4、Smad4 mediated BMP2 signal is essential for the regulation of GATA4 and Nkx2. 5 by affecting the histone H3 acetylation in H9c2 cells;

         (2014年发表于Biochemical and Biophysical Research Communications,作者:田杰)

       5、Effects and mechanism of downregulation of COX?2 expression by RNA interference on proliferation and apoptosis of human breast cancer MCF?7 cells;

         (2014年发表于Molecular Medicine Reports,作者:hui Han)

       6、MicroRNA-486-5p targeting PIM-1 suppresses cell proliferation in breast cancer cells;

         (2014年发表于Tumor Biology,作者:Zhenlin Yang)


    未分类

    产品>  

    本网站由阿里云提供云计算及安全服务
  • 老年人社保年审如何更便利 2019-05-17
  • 世界上海拔最高的无人超市将落户拉萨 2019-05-07
  • 【理上网来·喜迎十九大】“引进来”与“走出去”水平不断提高:我国吸收外资及对外投资情况“亮点纷呈” 2019-05-06
  • 国防部举行盛大招待会 热烈庆祝中国人民解放军建军90周年 中共中央总书记国家主席中央军委主席习近平和李克强张德江俞正声刘云山王岐山张高丽出席 2019-05-05
  • 把黄土高坡变绿的造林人 2019-05-05
  • 美俄掀起新一轮互相制裁风波。 2019-05-02
  • 电视剧抱团出海 又有哪些作品走出了国门 2019-04-29
  • 【访民情 惠民生 聚民心】多措并举拓宽村民脱贫路 2019-04-29
  • 湖州南浔赶超发展注入青春力量 2019-04-28
  • 端午小长假 我省北中部有雨 2019-04-23
  • 21岁CEO为留学生做“安保” 2019-04-23
  • 湖州德清义务教育标准化学校创建率达97.4% 2019-04-21
  • 房地产就有国家和集体之土地不计价到计价,这笔是经济收入还是财产收入? 2019-04-21
  • 凤凰古城端午抢鸭子大战引万人围观 2019-04-20
  • 警惕这些假冒高校网站!坑钱,还会毁了孩子前程! 2019-04-19
  • 京东彩票优惠券怎么用 体彩20选5开奖结果走 好运快3快3和值计划 高频彩票投注 海南飞鱼官网 极速快3是正规的吗 泳坛夺金走势图最近五天的 足球14场胜负彩投注 云南时时彩310开奖 新时时彩开奖规律 幸运飞艇属于官方吗 2012双色球基本走势图 新加坡快乐8开奖 四川金7乐万能四码 足球6场半全场胜负彩 极速时时彩万能规律